３８４１８ｓ、５．８ｓ的基因，其内转录间隔区部分（１３５１和ＩＴＳ２）进化较快，具有一定的种间特异性和种内保守性，可将念珠菌鉴定到种。Ｔｒｏｓｔ等９曾应用Ｕｌ和Ｕ２作为真菌通用引物扩增包含５．８Ｓ的ＩＴＳｌ和ＩＴＳ２区，其中光滑和季也蒙念珠菌的条带可以明显与其他菌的区别，但其余菌片段大小均在５００～６００ｂｐ之间难以区分。而本实验又基于ＩＴＳｌ和ＩＴＳ２区段的种间差异设计出种特异性引物，配合共同的反向引物Ｕ２，扩增出长度较短的特异性条带，白念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌这５种菌的条带有明显差异，但热带念珠菌和季也蒙念珠菌无法直接鉴别。因此，最终确立的多重ＰＣＲ反应体系同时结合通用和特异性引物，扩增出通用条带和特异性条带共两个条带。该体系使用Ｕ２作为共同的反向引物，减少了６重ＰＣＲ反应体系的引物条数，使原本需要１２条引物的多重反应体系仅需８条引物即可完成，大大地减少引物间的相互作用以及产生引物二聚体的可能性。国内现有的多重ＰＣＲ实验１０主要是鉴别白念珠菌和其他菌种，如曲霉、隐球菌等，不能鉴别出几个不同的念珠菌种。而龚业青等¨鉴定念珠菌菌种的多重ＰＣＲ体系，其扩增片段都在２００ｂｐ左右（季也蒙念珠菌２４８ｂｐ，近平滑念珠菌２２９ｂｐ，白念珠菌２１８ｂｐ和１１０ｂｐ，热带念珠菌２１９ｂｐ，克柔念珠菌１８２ｂｐ），不同菌种之间的片断差异较小，最终的结果判定很困难。本实验仅需１次普通ＰＣＲ反应，即能对常见的６种念珠菌鉴别到具体的菌种，每种菌扩增出两个条带，各菌种间的条带差异明显，类似于酶切的带型图，并且比酶切反应更简便易行，条带更清晰，能够轻松鉴定出６种念珠菌，为临床念珠菌感染的早期诊断到菌种赢得时间，从而使患者获得及时有效的治疗。该方法具有良好的实用性，今后我们还将进一步应用该方法对念珠菌深部感染的模拟标本及临床标本进行检验，以期能尽早推广应用于Ｉ临床。参考文献ｌＣａｒｖａ］ｈｏＡ，Ｃｏｓｔａ—Ｄｅ—ＯｌｉｖｅｉｒａＳ，Ｍａｒｔｉｎｓ眦，ｅｔａ１．ＭｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｉｓｈｔｃｌｉｎｉｃａｌｌｙｒｅｌｅｖａｎｔＣａｎｄｉｄａｓｐｅｃｉｅｓ．ＭｅｄＭｙｃｏｌ２００７；４５（７）：６１９—６２７．２ＰｆａｌｌｅｒＭＡ，ＤｉｅｋｅｍａＤＪ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｏｆｉｎｖａｓｉｖｅｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ：ａｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔｐｕｂｌｉｃｈｅａｌｔｈｐｒｏｂｌｅｍ．ＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＲｅｖ２００７；２０（１）：１３３—１６３．３ＫｒｃｍｅｒｙＶ。ＢａｒｎｅｓＡＪ．Ｎｏｎ—ａｌｂｉｃａｎｓＣａｎｄｉｄａｓｐｐ．ｅａｍｉｎｇｆｕｎ?ｇａｅｍｉａ：ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙａｎｄ卸ｔｉｆＩｌｌｌｇａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．ＪＨｏｓｐＩｎｆｅｃｔ２００２；５０（４）：２４３—２６０．４呲ＴＪ．Ｅｃｈｉｎｏｅａｎｄｉｎｓ一锄ａｄｖａｎｃｅｉｎｔｈｅｐｄｎⅧｒｙｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｎｖａｓｉｖｅｅａｎｄｉｄｉａｓｉｓ．ＮＥｎｄＪＭｅｄ２００２；３４７（２５）：２０７０—２０７２．５ＰａｐｐａｓＰＧ，ＫａｕｆｆｍａｎＣＡ，／ｈａｄｅｓＤ，ｅｔａ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌｐｌ刹ｃｅｇｕｉｄｅ?ｌｉｎｅｓｆｏｒｔｈｅｍａｒｔａｇｅｍｃｎｔｏｆｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ：２００９邯ｄａｔｅｂＹｔｈｅＩｄｅｃ—ｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓＳｏｃｉｅｔｙｏｆＡｍｅｒｉｃａ．ＣＡｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ２００９；４８（５）：５０３—５３５．６ＹｔｉｃｅｓｏｙＭ。ＭａｒｏｌＳ．ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆＣＨＲＤＭａｇａｒｃａｎｄｉｄａａｎｄＢＩＧＧＹａｇａｒｆｏｒｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｙｅａｓｔｓｐｅｃｉｅｓ．ＡｎｎＣａｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｆ岫ｅｎｉｃＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂ２００３；２９（２）：８．７ＯｚｃａｎＫ，ｌｌｋｉｔＭ，ＡｔｅｓＡ，ｅｔａ１．ＰｅｒｆｏｍａａｒｒｅｅＣａｎ—ｄｉｄａ／妞ａｎｄｏｆ瑚删ａｎｄ础ｙｆ．ｕｎ鲥哪ｆｌａｌＣＨＲＯＭａｇａｒＣａｎｄｉ＆ｉｎｒｅｃｏｖｅｒｙａｎｄｐｒ∞Ⅲｎｐｔｉｖｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｉｓｏｌａｔｅｓ．ＭｅｄＭｙｃｏｌ２００９；４（２）：ｌ一６．８ＦｅｎｎＪＰ，Ｓｅ列Ｈ，ＢａｒｌａｎｄＢ，ｅｔａ１．ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｕｐｄａｔｅｄＶｉｔｅｋＹｅａｓｔＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＣａｒｄａｎｄＡＰＩ２０ｔ２ｙｅａｓｔｉ＆ｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ１９９４；３２（５）：１１８４一１１８７．９ＴｒｏｓｔＡ，ＧｒａｆＢ，ＥｕｃｋｅｒＪ，ｅｔａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｃａｆｉｏｎｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｌｙｒｅｌｅ—ｒａｎｔＰＣＲ／ＲＦＬＰ．ＪＭｉｃｍｂｉｏｉＭｅｔｈｏｄｓ２００４；５６（２）：２０１—ｙｅａｓｔｓｂｙ２１１．１０刘军，沈永年，吕桂霞，等．ＰＣＲ检测深部致病真菌感染的研究．中华皮肤科杂志２００６；３９（８）：４３９—４４１．１１龚业青，陈兴平，陈映玲，等．多重ＰＣＲ技术快速鉴定血培养阳性标本中酵母菌菌种的应用研究．临床皮肤科杂志２００５；３４（１１）：７３５—７３７．（收稿：２００９—１１—１６修回：２０１０—０３—３０）《中国麻风皮肤病杂志））２０１０下半年征订、投稿启事《中国麻风皮肤病杂志》是由卫生部主管、中国麻风防治协会和山东省皮肤病性病防治研究所主办的国家级学术期刊；为中国科技核心期刊及科技论文统计源期刊。是广大皮肤病、性病及麻风病临床、防治、科研、教学工作者发表临床和研究报告的园地。本刊设有论著、短篇论著、临床防治、综述、继续医学教育、基层园地、中医中药、临床护理、病例报告、技术与方法、经验交流和人物等栏目。本刊２０１０年将继续开设“继续医学教育专题”并附相关试题，回答正确者将获国家级继续医学教育项目学分证书。本刊在国内外公开发行，国内统一刊号：笔荨劣端，为月刊，全年１２订阅方式：可直接从当地邮局订阅；或汇款至本刊编辑部订阅。ＪｔＪ］，每期定价７．５０，全年共９０．００元。邮发代号：２４—１７３。地址：山东省济南市槐荫区经十路２７３９７号，《中国麻风皮肤病杂志》编辑部，邮编：２５００２２编辑部电话：０５３１—８７５１５６４３，８７２９８８１７传真：０５３１—８７５１５６４３Ｅ—ｍａｉｌ：出ｎｍａｇ＠ｐｕｂｌｉｃ．ｊｎ．ｓｄ．Ｃｎ投稿方式：请通过网上投稿系统投稿，网址：ｗｗｗ．ｍｆｓｋｉｎ．ｎｅｔ，请勿重复投稿。万方数据